【摘要】目的探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对人肾小球系膜细胞增殖的影响及其在肾小球系膜细胞调控中对mTOR/p70s6K 信号通路的作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞,取传代培养至3~7 代细胞分为4组:正常对照组(加含5%胎牛血清DMEM 培养基),VD 组[加1,25(OH)2D3 10-8 mol/L],R 组(加雷帕霉素5 mg/L),R+VD 组[加雷帕霉素5 mg/L 及1,25(OH)2D3 10-8 mol/L],干预48 h。采用细胞增殖与活性检测试剂盒CCK-8 检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期时相分布,免疫荧光法检测细胞中mTOR、p70s6K 的表达情况。结果正常对照组、VD 组、R 组、R+VD 组:(1)吸光度值(A450)依次降低,组间多重比较差异均有统计学意义(均P < 0.05);抑制率(IR)依次升高。(2)G1 期细胞比例依次增加,S 期、G2/M 期依次减少,增殖指数(PI)依次降低,除R 组与VD 组比较差异无统计学意义外,其余组间多重比较差异均有统计学意义。(3)系膜细胞中mTOR、p70s6K 蛋白表达强度均依次降低,除R 组与VD 组比较差异无统计学意义外,其余组间多重比较差异均有统计学意义。结论1,25(OH)2D3 可显著抑制人系膜细胞增殖,且其可能通过抑制mTOR/p70s6K 信号通路调控肾小球系膜细胞增殖。
【关键词】
《科技创新导报》 2015-10-13
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《科技创新导报》 2015-10-14
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